Methyltransferase-like 3 affects glycolysis and proliferation of esophageal squamous cell carcinoma cells by regulating the GLUT4-mTORC1 axis / 中国肿瘤生物治疗杂志

@#[摘 要] 目的：探讨甲基转移酶样因子3（METTL3）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织和细胞中的表达水平及其对ESCC细胞糖酵解和增殖能力的影响和潜在的分子机制。方法：基于TCGA数据库分析METTL3在ESCC细胞中的表达及可能的富集通路。收集2021年1月至2021年6月间在北川医学院附属医院外科手术切除的34例ESCC组织及相应癌旁组织，采用免疫组化法验证ESCC组织中METTL3的表达。采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测干扰METTL3后ESCC细胞增殖能力的变化，利用比色法检测干扰METTL3后ESCC细胞总RNA中m6A的表达水平，采用甲基化RNA免疫沉淀定量PCR（MeRIP-qPCR）检测METTL3对葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）基因mRNA的m6A修饰水平的影响，采用WB和qPCR等技术探索METTL3参与ESCC细胞糖酵解的生物学机制。结果：METTL3在ESCC组织以及细胞中均呈高表达（均P<0.001）。干扰METTL3表达后，ESCC细胞的增殖能力明显减弱、细胞内总RNA的m6A修饰水平显著降低（均P<0.001）。此外，干扰METTL3可显著抑制KYSE150和TE-1细胞中GLUT4基因mRNA的m6A修饰水平（均P<0.01），并通过下调GLUT4的表达抑制葡萄糖的摄取以及乳酸的释放（均P<0.01），最终下调mTORC1通路活性并抑制ESCC细胞的增殖；在干扰METTL3的ESCC细胞同时联合运用mTORC1通路抑制剂显示有协同的抗癌作用。结论：METTL3介导的m6A修饰通过调控GLUT4-mTORC1信号轴影响ESCC细胞的糖酵解及增殖。